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乳酸脫氫酶(LDH)檢測(cè)試劑盒哪種方法更簡(jiǎn)單
更新時(shí)間:2021-04-16   點(diǎn)擊次數(shù):619次

乳酸脫氫酶(LDH)檢測(cè)試劑盒哪種方法更簡(jiǎn)單

 

乳酸脫氫酶(LDH)存在于人體各組織器官中。LDH是機(jī)體能量代謝中的一種重要酶,LDH質(zhì)與量的改變,直接影響到機(jī)體的能量代謝,當(dāng)機(jī)體各組織器官病變時(shí),其組織器官本身的LDH要發(fā)生改變,并且可引起血液中LDH改變。
 

LDH增高主要見(jiàn)于急性心肌梗塞、病毒性肝炎、肝硬化、肺梗塞、某些惡性腫瘤、骨骼肌病、有核紅細(xì)胞骨髓內(nèi)破壞(無(wú)效性造血)、白血病尤其是急性淋巴細(xì)胞型白血病、惡性貧血。
 

在具有尿毒癥的慢性腎病患者,血清LDH一般正常,經(jīng)透析治療后活性上升,可能與血清中LDH的抑制劑尿素、草酸鹽被除去有關(guān)。

 

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

LDH(EC 1.1.1.27)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是糖酵解途徑的末端酶,催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應(yīng),伴隨著 NAD+/NADH 之間互變。LDH 催化 NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸進(jìn)一步與 2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在堿性溶液中顯棕紅色,顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
 

操作步驟:

一、樣品測(cè)定的準(zhǔn)備:

1. 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(10

4個(gè)):提取液體積(mL)為 500-1000:1 的比例(建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,

功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次),8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

2. 組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5-10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液),進(jìn)行冰浴勻漿;8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

3. 血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
 

產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡(jiǎn)便:全程約40分鐘。
2、取樣量微:本法取樣量10ul~50ul即可測(cè)LDH活力
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
4、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.5%。
5、回收試驗(yàn): X =101%。
6、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
7、測(cè)試面廣:血清(漿)、組織、灌流液、培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)液等

 

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