信帆生物-ATP生物發(fā)光檢測試劑盒方便、快速、靈敏
簡介：
利用螢火蟲熒光素酶催化底物熒光素的轉(zhuǎn)化，利用ATP的能量發(fā)射出光子。發(fā)光信號與存在的ATP量呈正比的原理進行ATP的生物發(fā)光檢測。該產(chǎn)品可用于快速、定量測定液體樣品中或細胞或組織內(nèi)的ATP(adenosine 5'-triphosphate)水平。產(chǎn)品中的Lysis Buffer能夠有效裂解細菌、細胞以及微生物樣品，充分釋放ATP，適用于多種樣本來源的ATP檢測。Luciferase/Luciferin substrate采用優(yōu)化的酶反應(yīng)體系，產(chǎn)生的熒光在一分鐘內(nèi)保持穩(wěn)定。該產(chǎn)品檢測靈敏度達到 10-16 mol，檢測范圍在 10-11至 10-16 mol之間，可用于微量ATP檢測。
適用范圍：
可用于檢測多種來源樣品中細菌、細胞以及微生物的 ATP，及微量 ATP 檢測。
樣品裂解：
1.貼壁細胞的裂解：
吸除培養(yǎng)液，加入足夠覆蓋細胞的 Lysis Buffer（如 24 孔細胞培養(yǎng)板加入 150ul Lysis Buffer），可以使用移液器進行反復(fù)吹打或晃動培養(yǎng)板使 Lysis Buffer 充分接觸并裂解細胞，室溫靜置 5-10min 后，吸取上清進行檢測。
2.懸浮細菌、細胞的裂解：
轉(zhuǎn)移懸浮液到 1.5ml 離心管中，離心沉淀細胞，棄盡上清，按照 24 孔板每孔的細胞量對應(yīng) 150μl Lysis Buffer 的比例加入 Lysis Buffer，移液器反復(fù)吹打幾次，室溫靜置 5-10分鐘后，吸取上清進行檢測。對于懸浮樣品的裂解也可以將樣品充分混勻后直接吸取適量體積加入 Lysis Buffer，移液器反復(fù)吹打幾次，室溫靜置 5-10 分鐘后進行檢測。樣品體積不超過 Lysis Buffer 的1/3。 對植物、
3.動物組織樣品的裂解：
取適量組織樣品，加入適當(dāng)比例的 Lysis Buffer（如 20mg 植物組織加入 500ul Lysis Buffer）后用玻璃勻漿器或研缽進行勻漿。充分勻漿可以確保組織被*裂解，離心后取上清進行檢測。
其它來源的 ATP：
對于其它有效方法如三lv乙酸法等提取的 ATP 樣品，或游離 ATP 的檢測，可直接稀釋
到檢測范圍后用配制好的 Luciferase/Luciferin Reagent 進行檢測。
試劑盒優(yōu)點多多：
1. 方便：反應(yīng)試劑容易配制。
2. 檢測試劑產(chǎn)生的熒光穩(wěn)定性高，不需要快速混勻操作。
3. 快速：樣品裂解在 5-10 分鐘內(nèi)完成，加入稀釋后的 Luciferase/Luciferin substratet即可檢測。
4. 靈敏：可檢測少至 10-16 mol ATP。
注意事項：
1、 操作過程中需注意避免 ATP 污染，尤其是檢測微量 ATP 時，配制試劑時需用無菌水，使用的吸頭需滅菌，操作時戴一次性手套。
2、 Luciferase 活性可被多種去污劑抑制，其zui'佳 pH 為 7-8 之間，本試劑盒提供的裂解液用量不超過 10ul 時對 Luciferase/Luciferin Reagent 發(fā)光值沒有影響，但是如果需要采用其它裂解方法提取 ATP 時，需考慮裂解液成分對 luciferase 活性的影響。
3、 配制好的 Luciferase/Luciferin Reagent 在室溫放置 6 小時，4℃放置 7 天內(nèi)發(fā)光值下降在 10%之內(nèi)，因此檢測微量 ATP 時，為了降低背景發(fā)光值，可將 Luciferase/Luciferin Reagent 室溫放置 6 小時內(nèi)或 4℃放置 7 天內(nèi)以充分消耗 ATP
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